Eine der bekanntesten und größten Kirchenbauten in der Stadt ist die Basilica di San Lorenzo. Das Gotteshaus steht im Zentrum des Marktviertels und ist der städtischen Geschichtsschreibung zufolge die älteste Kirche in Florenz. Erste Vermerke auf den Bau der Kirche datieren zurück auf das Jahr 393.
Das Innere der Kirche ist stark von der Formensprache und Architektur der Renaissance in Florenz geprägt. Die filigranen Säulen verleihen dem Kirchenraum eine große gefühlte Höhe und lassen den Raum der riesigen Kirche leicht und luftig wirken. Die Gestaltung des Innenraums erfolgte unter Berücksichtigung der neu entdeckten Zentralperspektive.
Zu den bedeutendsten Werken der Kirche gehört das Fresko, das die Innenansicht der Kuppel ziert und die Szene des Jüngsten Gerichts zeigt. Neben dem Hauptschiff können die zahlreichen Nebenkapellen besichtigt werden. Zum Haupthaus gehört auch die angrenzende, aber durch einen separaten Eingang zugängliche Medici-Kapelle. In einer der Nebenkapellen im nördlichen Querschiff befindet sich das Altarbild der Verkündigung des berühmten Malers Filippo Lippi.
Ein weiterer Höhepunkt der Besichtigung der Basilika in Florenz ist ein Besuch in der Bibliothek, in der die Handschriftensammlung der Medici aufbewahrt wird. Die Treppenanlage zur Bibliothek wurde nach Entwürfen von Michelangelo gestaltet.
